三级文件 乳酸脱氢酶（LDH）测定标准操作程序 文件编号： 版本/状态：A/1 第2页 共3页 生效日期： 目的：建立乳酸脱氢酶（LDH）测定标准操作规程。 范围：适用于乳酸脱氢酶（LDH）测定的标准操作。 职责：生化部检验人员对本规程的实施负责。 规程： 1 测定方法：乳酸脱氢酶在催化乳酸生成丙酮酸的同时将NAD+还原成NADH。通过测定NADH在340nm处吸光度增加的速度可求得乳酸脱氢酶的活力。 LDH L-乳酸 + NAD+ ─────→ 丙酮酸 + NADH + H+ 2 仪器设备 GS200全自动生化分析仪 3 试剂 3.1 乳酸脱氢酶（LDH）试剂盒，包括试剂1（R-1）、试剂2(R-2)。 试 剂 R-1 R-2 3.2 成 份 L-乳酸锂 NAD+ 含 量 ≥76mmol/L ≥31mmol/l 分析用人基质质控血清（RANDOX）、血清 3.3 试剂稳定性与贮存 乳酸脱氢酶（LDH）试剂盒在2-8℃避光保存可稳定一年；试剂R-1、R-2开启后在2-8℃避光保存可稳定一个月。 3.4 样本稳定性与贮存 3.4.1 分析用人基质质控血清：该血清自生产之日起，在2-8℃下保持可稳定4年；该血清一旦复融，在25℃下可稳定24小时，在2-8℃下可稳定7天，在-20℃可稳定1个月。 3.4.2 待测血清： 2-8℃保存可稳定7天；-20℃保存可稳定3个月。样本不可反复冻融。不可使用已被污染的样本。 4 操作步骤 4.1 打开全自动生化仪，按照 GS200全自动生化分析仪操作维护保养程序，完成普
三级文件 通测试流程。 4.2 检验方法 乳酸脱氢酶（LDH）测定标准操作程序 文件编号： 版本/状态：A/1 第3页 共3页 生效日期： 分析方法：速率A；主波长：340nm；副波长：405nm；样品量：8.0ul；R-1：320ul，R-2：80ul；校准方式：K因子；反应方向：上升；测定温度：37℃。 样本与R-1混匀后反应5分钟，加入R-2混合后延迟53秒，测定104秒。 样本 8.0ul 主波长340nm R-1 320ul R-2 80ul 副波长405nm 测光 测 光 K=8199 0 5 6 8 min 4.3 计 算 △A/min×Vt×1000 ALT（U/L）= ───────────── 6.22×Vs× d △A/min = 每分钟吸光度变化率 Vt = 反应液总体积（ml） 1000 =U/ml到U/L的转换系数 6.22 = NADH的毫摩尔吸光系数 Vs = 样本体积（ml） d = 比色杯光径（cm） 5 检验结果的解释 抗坏血酸≤50mg/dl、游离胆红素≤684umol/L（40mg/dl），结合胆红素≤855umol/L（50mg/dl）、乳糜微粒≤2500浊度单位对测定无影响。 6 注意事项 6.1 高度溶血可导致正的误差。
