・１１６８・ 临床与实验病理学杂志Ｊ Ｃｌｉｎ Ｅｘｐ Ｐａｔｈｏｌ ２０１３ Ｎｏｖ；２９（１１） 结直肠腺癌中ｍｉＲＮＡ—ｌＯａ的表达及意义 张志勇 ，赵增仁 ，吴晨鹏 ，贺新奇 ，张丽静 ，樊智彬 摘要：目的探讨ｍｉｃｒｏＲＮＡ一１０ａ（ｍｉＲ一１０ａ）在结直肠腺癌中的表达及其临床病理学意义。方法 应用茎环逆转录实时定量 、ＨＣＴ一１１６ｐｓ ）以及 ＰＣＲ检测ｍｉＲ—ｌＯａ在结肠腺癌细胞（ＳＷ６２０、ＳＷ４８０、ＳＷ１１１６、ＨＴ２９、ＤＬＤ１、ＬＯＶＯ、Ｃａｃｏ－２、ＨＣＴ一１１６ｐ５ 与临床病理特征和ｐ５３的相关性。结果正常结肠细胞ＣＣＤ一１８Ｃｏ的表达；检测ｍｉＲ一１０ａ在４４例结直肠腺癌新鲜标本及对应切缘无瘤黏膜组织中的表达，分析其表达 ｍｉＲ一１０ａ在ＳＷ６２０、ＳＷ４８０、ＳＷ１１１６、ＨＴ２９、ＤＬＤ１、ＬＯＶＯ、Ｃａｃｏ．２细胞中的表达明显 低于ＣＣＤ一１８Ｃｏ细胞。ｍｉＲ一１０ａ在结直肠腺癌组织中的表达明显低于无瘤黏膜组织（Ｐ＜０．０５），在非黏液癌中的表达高于黏 液癌（Ｐ＝０．０２２ ４），但与患者性别、年龄、肿瘤部位、浸润深度、分化程度、淋巴结转移和Ｄｕｃｋ分期均无关（Ｐ均＞０．０５）。结肠 癌细胞ＨＣＴ一１１６ “ 中ｍｉＲ一１０ａ的表达略高于ＨＣＴ一１１６ 关键词：结直肠肿瘤；结直肠腺癌；ｎｆｉＲＮＡ一１０ａ；ｐ５３ 中图分类号：Ｒ ７３５．３ 文献标志码：Ａ 文章编号：１００１—７３９９（２０１３）１１—１１６８—０４ 一，差异无统计学意义（Ｐ＝０．６４９）。结论结直肠腺癌中ｍｉＲ一 １０ａ低表达，且与肿瘤黏液分泌相关。ｍｉＲ—ｌＯａ可能在结直肠腺癌的发生、发展中发挥抑癌作用，其与肿瘤组织学分化有关。 Ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ ｂｅｔｗｅｅｎ ｍｉＲＮＡ－ｌＯａ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ａｎｄ ｃｌｉｎｉｃＯｐａｔｈｏｌＯｇｉｃａｌ ｃｈａｒａｃｔｅｒｓ ｉｎ ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ ａｄｅｎｏｃａｒｃｉｎｏｍａ ＺＨＡＮＧ Ｚｈｉ－ｙｏｎｇ ，ＺＨＡＯ Ｚｅｎｇ—ｒｅｎ ，ＷＵ Ｃｈｅｎ—ｐｅｎｇ ，ＨＥ Ｘｉｎ—ｑｉ ，ＺＨＡＮＧ Ｌｉ－ｊｉｎｇ ，ＦＡＮ Ｚｈｉ—ｂｉｎ ｎａ；。Ｄｅｐａｒｔｅｎｔｍ ｏｆ Ｇｅｎｅｒａｌ Ｓｕｒｇｅｒｙ，Ｆｉｒｓｔ Ｈｏｓｐｉｔａｌ （ Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆＰａｔｈｏｌｏｇｙ，Ｔａｎｇｓｈａｎ Ｇｏｎｇｒｅｎ Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｔａｎｇｓｈａｎ ０６８０００，ＣｈｉｏｆＨｅｂｅｉ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｈｉｊｉａｚｈｕａｎｇ ０５００３１，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｐｕｒｐｏｓｅ Ｔｏ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｍｉＲＮＡ一１０ａ（ｍｉＲ—ｌＯａ）ｉｎ ｃｏｌｏｎ ａｄｅｎｏｃａｒｃｉｎｏｍａ ｃｅｌｌ ｌｉｎｅｓ ａｎｄ ｃｏｌｏｒｅｅｔａｌ ａｄｅｎｏ— ｃａｒｃｉｎｏｍａ（ＣＲＣ）ｔｉｓｓｕｅｓ，ａｎｄ ｔｏ ａｎａｌｙｚｅ ｔｈｅ ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ ｂｅｔｗｅｅｎ ｍｉＲ一１０ａ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ａｎｄ ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌ ｆｅａｔｕｒｅｓ ｏｆ ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ ａｄｅｎｏｃａｒ— ｃｉｎｏｍａ．Ｍｅｔｈｏｄｓ ｎｆｉＲ一１０ａ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｗａｓ ｅｘａｍｅｄ ｉｎ ｃｏｌｏｎ ｃａｒｃｉｎｏｍａ ｃｅｌｌ ｌｉｎｅｓ，ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ ＳＷ６２０，ＳＷ４８０，ＳＷ１ ｌ １６，ＨＴ２９， ＤＬＤ１，ＬＯＶＯ，Ｃａｃｏ－２，ＨＣＴ １ １６ ，ＨＣＴ一１ １６ ａｎｄ ｎｏｒｍａｌ ｃｏｌｏｎ ｃｅｌｌ ｌｉｎｅ ＣＣＤ一１８Ｃｏ，ａｎｄ ｉｎ ｐｒｉｍａｒｙ ｔｕｍｏｒ ｔｉｓｓｕｅｓ（ｎ＝４４） ａｎｄ ｔｈｅ ｍａｔｃｈｅｄ ｍａｒｇｉｎａｌ ｍｕｃｏｓａ（ｔｕｍｏｒ ｆｒｅｅ）ｆｒｏｍ ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ ａｄｅｎｏｃａｒｃｉｎｏｍａ ｂｙ ｒｅａｌ—ｔｉｍｅ ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ ｒｅｖｅｒｓｅ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ—ＰＣＲ （ＲＴ—ＰＣＲ）．Ｔｈｅ ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ ｂｅｔｗｅｅｎ ｔｈｅ ｌｅｖｅｌｓ ｏｆ ｍｉＲ一１０ａ ａｎｄ ｃｌｉｎｉｃ叩ａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌ ｆｅａｔｕｒｅｓ ｏｆ ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ ａｄｅｎｏｃａｒｃｉｎｏｍａ ｏｒ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓ— ｓｉｏｎ ｏｆ ｐ５３ ＲＮＡ ｗａｓ ａｌｓｏ ａｎａｌｙｚｅｄ．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｍｉＲ一１０ａ ｗａｓ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｄｏｗｎｒｅｇｕｌａｔｅｄ ｉｎ ｃｏｌｏｎ ｃａｒｃｉｎｏｍａ ｃｅｌｌ ｃｏｉｎ— ｐａｒｅｄ ｔｏ ｎｏｒｍａｌ ｃｏｌｏｎ ｃｅｌ１．Ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｍｉＲ一１０ａ ｉｎ ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ ｔｕｍｏｒ ｗａｓ ｌｏｗｅｒ ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｉｎ ｍａｒｇｉｎａｌ ｍｕｃｏｓａ（Ｐ＜０．０５）．ｍｉＲ一 １０ａ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｉｎ ｎｏｎ—ｍｕｃｉｎｏｕｓ ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ ｃａｎｃｅｒｓ ｗａｓ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｄｅｃｒｅａｓｅｄ ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｉｎ ｍｕｃｉｎｏｕｓ ｃａｎｃｅｒｓ（Ｐ＝０．０２２ ４）．Ｔｈｅｒｅ ｗａｓ ｎｏ ｓｉｇｎｉｉｃａｎｔｆ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ ｂｅｔｗｅｅｎ ｔｈｅ ｍｉＲ一１０ａ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ａｎｄ ｇｅｎｄｅｒ，ａｇｅ，ｌｏｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｕｍｏｒ，ｄｅｐｔｈ ｏｆ ｉｎｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ，ｄｅｇｒｅｅ ｏｆ ｄｉｆｆｅｒｅｎａ— ｔｉｏｎ，ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ ｏｆ ｌｙｍｐｈ ｎｏｄｅ ａｎｄ Ｄｕｋｅ ｓｔａｇｅ（ａｌｌ Ｐ＞０．０５）．Ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｍｉＲ—ｌＯａ ｉｎ ＨＣＴ一１ １６ ｗａｓ ｅｎｈａｎｃｅｄ ａｓ ｃｏｍ— ｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ＨＣＴ一１ １６ 一 ～ｃｅｌｌ ｌｉｎｅ，ｂｕｔ ｔｈｅｒｅ ｗａｓ ｎｏ ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｔ ｄｉｆｅｒｅｎｃｅ（Ｐ＝０．６４９）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ ｍｉＲ一１０ａ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｗａｓ ｄｏｗｎ— ｒｅｇｕｌａｔｅｄ ｉｎ ＣＲＣ，ａｎｄ ｒｅｌａｔｅｄ ｔｏ ｈｉｓｔｏｌｏｇｙ ｏｆ ｔｕｍｏｕｒ．ｍｉＲ一１０ａ ｍｉｇｈｔ ａｃｔ ａｓ ａ ｔｕｍｏｒ ｓｕｐｐｒｅｓｓｏｒ ｉｎ ＣＲＣ，ａｎｄ ｂｅ ｒｅｌａｔｅｄ ｔｏ ｔｈｅ ｄｉｆｅｒｅｎａ— ｔｉｏｎ ｏｆ ｔｕｍｏｕｒ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ ｎｅｏｐｌａｓｍ；ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ ａｄｅｎｏｃａｒｃｉｎｏｍａ；ｍｉＲＮＡ一１０ａ；ｐ５３ 结直肠癌是最常见的恶性肿瘤之一，国内发病率 逐年上升 Ｊ。ｍｉｃｒｏＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）在肿瘤中的作用逐 渐成为研究热点。有研究报道ｍｉＲＮＡ一１０ａ（ｍｉＲ一１０ａ） 可通过多种信号传导途径发挥抑癌或促癌作 用 。目前，ｍｉＲ一１０ａ在结直肠腺癌中的作用鲜有 报道。本文通过检测ｍｉＲ．１０ａ在结直肠腺癌细胞株 和组织中的表达，分析其与肿瘤病理特征的关系，为 探讨结直肠腺癌的发病机制提供新依据。 收稿日期：２０１３—０９—２９ 基金项目：国家自然科学基金（８１０７２０３４） 作者单位： 唐山市工人医院病理科０６３０００ 河北医科大学第一医院普外科，石家庄０５００３１ 作者简介：张志勇，女，博士，主任医师。Ｔｅｌ：（０３１５）３７２２４４１，Ｅ—ｍａｉｌ ｚｈｉｙｏｎｇｚｈａｎｇｌ＠ｈｏｔｍａｉｌ．ｃｏｉｎ １材料与方法 １．１材料 赵增仁，男，博士，主任医师，通讯作者 临床与实验病理学杂志，Ｃｌｉｎ Ｅｘｐ Ｐａｔｈｏｌ ２０１３ Ｎｏｖ；２９（１１） ’１１６９・ １．１．１ 结肠癌细胞株８种细胞株（ＳＷ６２０、 ＳＷ４８０、ＳＷ１１１６、Ｈ，Ｉ２９、ＤＬＤ１、ＬＯＶＯ、Ｃａｃｏ・２、ＣＣＤ一 １８Ｃｏ）由中文大学于君教授惠赠，人结肠癌 ＨＣＴ一１ １６ｐ５。 、ＨＣＴ一１ １６ ｐ５ 细胞由约翰霍普金斯 大学Ｂｅｒｔ Ｖｏｇｅｌｓｔｅｉｎ教授赠予瑞典Ｌｉｎｋｆｉｐｉｎｇ大学孙 晓峰教授后转赠。 １．１．２结直肠腺癌组织标本收集２０１１年５月～ ２０１２年５月河北医科大学第四医院、第一医院４４ 例新鲜结直肠腺癌组织及对应切缘无瘤黏膜组织， 离体后迅速置于液氮，存于一８０℃备用。所有患者 术前均未接受任何放、化疗，术后经病理证实符合 ＷＨＯ结直肠腺癌诊断标准，切缘无瘤黏膜未受侵 犯。４４例患者年龄３１～８３岁，平均（６４．５２± １３．９７）岁；男性２５例，女性１９例；结肠癌２１例，直 肠癌２３例；肌层以内９例，侵及浆（外）膜及以外３５ 例；高分化２例，中分化３５例，低分化７例；非黏液 癌３４例，黏液癌９例，资料缺失１例；无淋巴结转移 ２８例，有淋巴结转移１６例；Ｄｕｋｅ分期：Ａ期５例，Ｂ 期２２例，Ｃ期１３例，Ｄ期４例。 １．２试剂ＭｃＣｏｙｓ ５Ａ培养液、ＤＭＥＭ培养液、Ｌｅｉ— ｂｏｖｉｔｚ Ｌ．１５培养液、胎牛血清（ｆｅｔａｌ ｂｏｖｉｎｅ ｓｅｒｕｍ， ＦＢＳ）、青链霉素（ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｎ＋Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｉｎ，ＰＥＳＴ）， 均购自美国Ｇｉｂｃｏ公司；Ｔｒｉｚｏｌ试剂购自美国Ｉｎｖｉｒｏ— ｔｒｏｇｅｎ公司；茎环逆转录荧光定量ＰＣＲ试剂盒Ａｌ１． ｉｎ—Ｏｎｅ ｍｉＲＮＡ ｑＲＴ—ＰＣＲ Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ Ｋｉｔ、Ｕ６、ｍｉＲ一１０ａ 引物，均购自广州复能基因公司。 １．３方法 １．３．１ 细胞培养 ＣＣＤ一１８Ｃｏ、ＨＣＴ．１１６、ＨＴ－２９细 胞选用ＭｃＣｏｙｓ ５Ａ培养液，ＳＷ４８０、ＳＷ６２０、ＳＷ１１１６ 细胞选用Ｌｅｉｂｏｖｉｔｚ Ｌ一１５培养液，ＤＬＤ１、ＬＯＶＯ、Ｃａｃｏ一 ２选用ＤＭＥＭ培养液，培养液均加入１０％ＦＢＳ和 １％ＰＥＳＴ。培养条件为３７℃、５％ＣＯ ，根据生长情 况每２～３天换１次培养液，当细胞覆盖瓶底壁大部 分表面时，进行细胞传代或收集。 １．３．２细胞和组织总ＲＮＡ提取将５０ ｍｇ组织或 细胞标本中加入１ ｍｌ Ｔｒｉｚｏｌ匀浆，静置５ ｍｉｎ，加氯 仿０．２ ｍｌ，混匀后静置５ ｍｉｎ，４ ｃＩＣ １２ ０００ ｇ离心１５ ｍｉｎ，吸取上层无色液相，加入０．５ ｍｌ异丙醇，静置 １５ ｍｉｎ，４ ｏＣ １２ ０００ ｇ离心１５ ｍｉｎ，可见ＲＮＡ沉淀， 弃上清，加７５％乙醇１ ｍｌ混匀，４℃７ ５００ ｇ离心５ ｍｉｎ，弃上清，无ＲＮＡ酶水溶解。琼脂糖凝胶电泳检 测ＲＮＡ完整性、分光光度计检测ＲＮＡ浓度及纯度。 １．３．３ 茎环逆转录实时定量ＰＣＲ检测ｍｉＲ—ｌＯａ的 表达取总ＲＮＡ ２ ｇ进行逆转录反应，反应体系： 总ＲＮＡ ２ ｇ、２．５ Ｕ／ｉｘｌ ＰｏｌｙＡ Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ １ ｌ、ＲＴａｓｅ Ｍｉｘ １ ｔｘｌ、５ Ｘ Ｒｅａｃｔｉｏｎ Ｂｕｆｆｅｒ ５ ｌ、ＤＥＰＣ水补至２５ 。反应条件：３７℃６０ ｍｉｎ，８５℃５ ｒａｉｎ。取逆转 录产物ｃＤＮＡ ２ ｔｚｌ进行实时定量ＰＣＲ反应，反应体 系：２×Ａ１１．ｉｎ．Ｏｎｅ ｑＰＣＲ Ｍｉｘ １０ ｌ、Ａｌｌ—ｉｎ—Ｏｎｅ ｍｉＲ・ ＮＡ ｑＰＣＲ Ｐｒｉｍｅｒ ２ Ｉｘｌ、Ｕｎｉｖｅｒｓａｌ Ａｄａｐｔｏｒ ＰＣＲ Ｐｒｉｍｅｒ ２ ｌ、ｃＤＮＡ（５倍稀释）２ ｔｘｌ、ＤＥＰＣ水４ ｔｚｌ。反应条 件：９５℃预变性１０ ｍｉｎ，然后按９５℃１０ Ｓ，６０℃３０ Ｓ，７２℃１０ Ｓ，进行４５个循环。以上各步骤中，反应 体系以及试剂用量均严格按照Ａｌｌ—ｉｎ—Ｏｎｅ ｍｉＲＮＡ ｑＲＴ—ＰＣＲ Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ Ｋｉｔ说明书进行操作。ｍｉＲ．１０ａ 的相对表达量用２ ‘法计算。 １．４统计学分析采用ＳＰＳＳ １３．０软件对数据进 行统计分析，以中位数（四分位数间距）或 ±ｓ表 示，两组间配对样本采用Ｗｉｌｃｏｘｏｎ检验或配对ｔ检 验，两组间样本采用Ｍａｎｎ－Ｗｈｉｔｎｅｙ检验。 ２ 结果 ２．１ ｍｉＲ－ｌＯａ在结肠腺癌细胞及结肠正常细胞中 的表达ｍｉＲ．１０ａ在结肠腺癌细胞ＳＷ６２０、ＳＷ４８０、 ＳＷ１１１６、ＨＴ２９、ＤＬＤ１、ＬＯＶＯ、Ｃａｃｏ一２中的相对表达 量均显著低于其在结肠正常细胞ＣＣＤ一１８Ｃｏ中的相 对表达量（表１，图１）。 表１ ｍｉＲＮＡ一１０ａ在结肠癌细胞和结肠正常细胞中的表达 Ｏ．４ ０＿３ ‘捉 ０．２ ｇ 量 Ｏ．１ ０．０ Ａ Ｂ Ｃ Ｄ Ｅ Ｆ Ｇ Ｈ 图１ ｍｉＲＮＡ－１０ａ在结肠腺癌细胞和结肠正常细胞中的表达 Ａ．ＣＣＤ一１８Ｃｏ；Ｂ．ＳＷ６２０；Ｃ．ＳＷ４８０；Ｄ．ＳＷ１１１６；Ｅ．ＨＴ２９；Ｆ．ＤＬＤ１； Ｇ．ＬＯＶＯ；Ｈ．Ｃａｃｏ－２ ・１１７０。 临床与实验病理学杂志Ｊ Ｃｌｉｎ Ｅｘｐ Ｐａｔｈｏｌ ２０１３ Ｎｏｖ；２９（１１） ２．２ ｍｉＲ一１０ａ在结直肠腺癌组织中的表达 ｍｉＲ． １０ａ在４４例结直肠腺癌组织中的相对表达量０．１１１ ２．４ 结肠腺癌细胞中ｍｉＲ－１０ａ与ｐ５３的关系 ｍｉＲ．１０ａ在ＨＣＴ一１１６ 中的相对表达量（０．０５７ ４ （０．０３７，０．３４８）显著低于其相应切缘无瘤黏膜组织 中的相对表达量０．１８４（０．０９６，０．３２４）（Ｚ＝ ±０．０２３）略高于其在ＨＣＴ．１１６ Ｉ／一中的相对表达 量（０．０４７±０．０１２），两组相比差异无统计学意义（ｔ 一２．４８６，Ｐ＝０．０１３ １，图２）。 １０ ｌ 鬈 詈 。主量 ０．１ ０．Ｏｌ 切缘无瘤黏膜组织 结直肠癌组织 图２ ｍｉＲ・１０ａ在切缘无瘤黏膜组织及结直肠腺癌组织中的表达 蛐 茛 ｇ＿【 【Ⅲ Ｏ ０ Ｏ ２．３ ｍｉＲ－１０ａ与结直肠腺癌临床病理学特征的关 ∞ 系 ｍｉＲ一１０ａ表达与结直肠腺癌组织学分型相关， 即在非黏液癌中的表达水平０．７０６（０．３４４，１．１５３） 显著高于黏液癌０．２２５（０．０９４ ７，０．６２６）（Ｚ＝７６，Ｐ ＝０．０２２ ４）；其表达与患者性别、年龄、部位、浸润深 度、分化程度、淋巴结转移和Ｄｕｋｅ分期无关（Ｐ均 ＞０．０５，表２）。 表２ ｍｉＲＮＡ．１０ａ的表达与结直肠腺癌临床病理特征的关系 ＝０．５３０，Ｐ＝０．６４９，图３）。 图３ ｍｉＲ．１０ａ在ＨＣＴ．１ｌ６ｐｓ 与ＨＣＴ．１１＠ｓ 一 一中的表达 Ｏ Ａ．ＨＣＴ．１１６ｖ５ “：ＢＨＣＴ一１１６ ｐ５ 一 一 ．∞ ３讨论 ｍｉＲＮＡ是一种非编码ＲＮＡ，其通过与靶基因３ ＵＴＲ结合，靶基因表达，影响细胞的生长、增 殖、分化、凋亡等一系列生理过程。ｍｉＲＮＡｓ在肿瘤 发生、发展过程中发挥重要作用。ｍｉＲ一１０ａ在多种 恶性肿瘤中均有异常表达，但不同肿瘤中ｍｉＲ一１０ａ 表达不尽相同。ｍｉＲ．１０ａ在原发性肝细胞肝癌中表 达水平显著升高 』，在膀胱癌＿３ Ｊ、胰腺癌 Ｊ、急性 髓样白血病 ’ 中ｍｉＲ一１０ａ也呈高表达。然而，慢性 髓样白血病患者中ｍｉＲ一１０ａ表达下调，并通过 上游刺激因子２的表达促进细胞增殖 Ｊ。ｍｉＲ一１０ａ 在乳腺癌、食管癌、头颈部鳞癌 中的表达亦下 调。本组ｍｉＲ．１０ａ在多种结肠腺癌细胞株以及结直 肠腺癌组织中的表达均显著降低，与部分研究结果 一致＿８ ，提示ｍｉＲ．１０ａ可能在结直肠癌的发生中 发挥抑癌作用，作者猜测ｍｉＲ一１０ａ在不同肿瘤的表 达差异可能是作用基因位点或信号传导途径不同所 致。 结直肠黏液癌在临床病理特征、基因特征及生 物学行为等方面与非黏液癌存在显著差异。与非黏 液型结直肠腺癌相比，黏液型分期更晚，易发生转 移，预后较差¨ 。本组结直肠黏液癌中ｍｉＲ一１０ａ表 达水平明显低于非黏液癌，提示ｍｉＲ－１０ａ表达与肿 瘤分化有关。Ｌｉ等＿１ 对骨髓异常增生综合征的研 究发现ｍｉＲ－１０ａ／ｂ高表达，并证实是通过ＮＦ—ＫＢ和 ｐ５３发挥作用。本组ｍｉＲ一１０ａ在ＨＣＴ一１１６ 和 临床与实验病理学杂志Ｊ Ｃｌｉｎ Ｅｘｐ Ｐａｔｈｏｌ ２０１３ Ｎｏｖ；２９（１１） ＨＣＴ一１１６ｐ５３ 一中表达无明显差异，提示ｍｉＲ一１０ａ表 ｃｏｌ，２０１２，１９（７）：２３９４—４０２． 达与ｐ５３表达是否缺失无关，作者认为这两种肿瘤 ［６］ Ｏｖｃｈａｒｅｎｋｏ Ｄ，Ｓｔｏｌｚｅｌ Ｆ，Ｐｏｉｔｚ Ｄ，ｅｔ ａ１．ｍｉＲ一１０ａ ｏｖｅｒｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｉｓ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ ＮＰＭ１ ｍｕｔａｔｉｏｎｓ ａｎｄ ＭＤＭ４ ｄｏｗｎｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ ｉｎ 的发生机制不尽相同，其中ｍｉＲ—ｌＯａ机制也可 ｉｎｔｅｒｍｅｄｉａｔｅ—ｒｉｓｋ ａｃｕｔｅ ｍｙｅｌｏｉｄ ｌｅｕｋｅｍｉａ［Ｊ］．Ｅｘｐ Ｈｅｍａｔｏｌ， 能不同。Ｈａｎｓｋｉ等 的研究提示ｐ５３、Ｋ—ｒａｓ和 ２０１１，３９（１０）：１０３０—４２． ＭＵＣ２基因的突变率在结直肠黏液癌与非黏液癌中 ［７］Ｂｒｙａｎｔ Ａ，Ｐａｌｍａ Ｃ Ａ，Ｊａｙａｓｗａｌ Ｖ，ｅｔ ａ１．ｍｉＲ－１０ａ ｉｓ ａｂｅｒｒａｎｔｌｙ ｏｖｅｒｅｘｐｒｅｓｓｅｄ ｉｎ Ｎｕｃｌｅｏｐｈｏｓｍｉｎ １ ｍｕｔａｔｅｄ ａｃｕｔｅ ｍｙｅｌｏｉｄ ｌｅｕｋａｅ－ 存在显著差异。不表达ｐ５３和ｐ１６的黏液癌患者预 ｍｉａ ａｎｄ ｉｔｓ ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ ｉｎｄｕｃｅｓ ｃｅｌｌ ｄｅａｔｈ［Ｊ］．Ｍｏｌ Ｃａｎｃｅｒ， 后相对较好 。研究表明ｐ５３和ｐ１６位于两条不 ２０１２，１１：８． 同的信号传导通路：ｐ１４ＡＲＦ＿ｐ５３和ｐ１６Ⅲ ，这是调 ［８］ Ａｇｉｒｒｅ Ｘ，Ｊｉｍ６ｎｅｚ－Ｖｅｌａｓｃｏ Ａ，Ｓａｎ Ｊｏｓ６一Ｅｎ６ｆｉｚ Ｅ，ｅｔ ａ１．Ｄｏｗｎ— 控细胞周期至关重要的两条通路，与肿瘤细胞增殖 ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｈｓａ—ｍｉＲ一１０ａ ｉｎ ｃｈｒｏｎｉｃ ｍｙｅｌｏｉｄ ｌｅｕｋｅｍｉａ ＣＤ３４＋ 密切相关。本实验结果表明结肠腺癌中ｍｉＲ—ｌＯａ表 ｃｅｌｌｓ ｉｎｃｒｅａｓｅｓ ＵＳＦ２一ｍｅｄｉａｔｅｄ ｃｅｌｌ ｇｒｏｗｔｈ［Ｊ］．Ｍｏｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ， ２００８，６（１２）：１８３０—４０． 达与ｐ５３之间在生物学功能上并无相关性，进而推 ［９］Ｔａｎ Ｙ，Ｚｈａｎｇ Ｂ，Ｗｕ Ｔ，ｅｔ ａ１．Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎａｌ ｉｎｈｉｂｉｔｏｎ ｏｆ Ｈｏｘｄ４ 测ｍｉＲ一１０ａ发挥作用可能与ｐ１４ＡＲ －ｐ５３通路无关。 ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｂｙ ｍｉＲＮＡ—ｌＯａ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｂｒｅａｓｔ ｃａｎｃｅｒ ｃｅＨｓ［Ｊ］．ＢＭＣ Ｃｈｉｅｎ等 报道ｐ１６ｍ 通路和ｍｉＲＮＡ通路之间 Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ，２００９，１０：１２． 可能存在交叉，可共同在转录后水平调节靶蛋白表 ［１０］Ｍａｔｓｕｓｈｉｍａ Ｋ，Ｉｓｏｍｏｔｏ Ｈ，Ｋｏｈｎｏ Ｓ，ｅｔ ａ１．ＭｉｃｒｏＲＮＡｓ ａｎｄ ｅ— ｓｏｐｈａｇｅａｌ ｓｑｕａｍｏｕｓ ｃｅｌｌ ｃａｒｃｉｎｏｍａ［Ｊ］．Ｄｉｇｅｓｔｉｏｎ，２０１０，８２（３）： 达。ｍｉＲ．１０ａ是否通过信号传导通路ｐ１６ 发挥 １３８—４４． 其功能，其具体机制尚需进一步印证。 ［１ １］Ｈｕｉ Ａ Ｂ，Ｌｅｎａｒｄｕｚｚｉ Ｍ，Ｋｍｓｈｅｌ Ｔ，ｅｔ ａ１．Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ Ｍｉ— ｃｒｏＲＮＡ ｐｒｏｆｉｌｉｎｇ ｆｏｒ ｈｅａｄ ａｎｄ ｎｅｃｋ ｓｑｕａｍｏｕｓ ｃｅｌｌ ｃａｒｃｉｎｏｍａｓ［Ｊ］． 参考文献： Ｃｌｉｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ，２０１０，１６（４）：１１２９—３９． ［１２］Ｓｏｎｇ Ｗ，Ｗｕ Ｓ Ｊ，Ｈｅ Ｙ Ｌ，ｅｔ ａ１．Ｃｌｉｎｉｃｏｐａｔｈｏｌｏｇｉｃ ｆｅａｔｕｒｅｓ ａｎｄ Ｆｅｒｌａｙ Ｊ，Ｓｈｉｎ Ｈ Ｒ，Ｂｒａｙ Ｆ，ｅｔ ａ１．Ｅｓｔｉｍａｔｅｓ ｏｆ ｗｏｒｌｄｗｉｄｅ ｂｕｒｄｅｎ ｓｕｒｖｉｖａｌ ｏｆ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ ｍｕｃｉｎｏｕｓ，ｓｉｇｎｅｔ—ｉｒｎｇ ｃｅｌｌ ｏｒ ｏｆ ｃａｎｃｅｒ ｉｎ ２００８：ＧＬＯＢＯＣＡＮ ２００８［Ｊ］．１ｎｔ Ｊ Ｃａｎｃｅｒ，２０１０， ｎｏｎ—ｍｕｃｉｎｏｕｓ ａｄｅｎｏｃａｒｃｉｎｏｍａ：ｅｘｐｅｒｉｅｎｃｅ ａｔ ａｎ ｉｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎ ｉｎ １２７（１２）：２８９３—９１７． ｓｏｕｔｈｅｒｎ Ｃｈｉｎａ［Ｊ］．Ｃｈｉｎ Ｍｅｄ Ｊ（Ｅｎｇ１），２００９，１２２（１３）：１４８６— ［２］ Ｖａｒｎｈｏｌｔ Ｈ，Ｄｒｅｂｈｅｒ Ｕ，Ｓｃｈｕｌｚｅ Ｆ，ｅｔ ａ１．ＭｉｃｒｏＲＮＡ ｇｅｎｅ ｅｘ－ ９１． ｐｒｅｓｓｉｏｎ ｐｒｏｆｉｌｅ ｏｆ ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｃ ｖｉｒｕｓ－ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒ ｃａｒｃｉ＿ ［１３］Ｌｉ Ｘ，Ｘｕ Ｆ，Ｃｈａｎｇ Ｃ，ｅｔ ａ１．Ｔｒｎａｓｃｒｉｐｔｉｏｎａｌ ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｍｉＲ一 ｎｏｍａ［Ｊ］．Ｈｅｐａｔｏｌ，２００８，４７（４）：１２２３—３２． １０ａ／ｂ ｂｙ ＴＷＩＳＴ一１ ｉｎ ｍｙｅｌｏｄｙｓｐｌａｓｔｉｃ ｓｙｎｄｒｏｍｅｓ［Ｊ］．Ｈａｅｍａｔｏ— ［３］ Ｖｅｅｒｌａ Ｓ，Ｌｉｎｄｇｒｅｎ Ｄ，Ｋｖｉｓｔ Ａ，ｅｔ ａ１．ＭｉＲＮＡ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｉｎ ｌｏｇｉｃａ，２０１３，９８（３）：４１４—９． ｕｒｏｔｈｅｌｉａｌ ｃａｒｃｉｎｏｍａｓ：ｉｍｐｏｒｔａｎｔ ｒｏｌｅｓ ｏｆ ｍｉＲ—ｌＯａ，ｍｉＲ－２２２， ［１４］Ｈａｎｓｋｉ Ｃ，Ｔｉｅｃｋｅ Ｆ，Ｈｕｍｍｅｌ Ｍ，ｅｔ ａ１．Ｌｏｗ ｆｒｅｑｕｅｎｃｙ ｏｆ ｐ５３ ｍｉＲ一１２５ｂ，ｍｉＲ－７ ａｎｄ ｍｉＲ－４５２ ｆｏｒ ｔｕｍｏｒ ｓｔａｇｅ ａｎｄ ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ， ｇｅｎｅ ｍｕｔａｔｉｏｎ ａｎｄ ｐｒｏｔｅｉｎ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｉｎ ｍｕｃｉｎｏｕｓ ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ ｃａｒｃｉ— ａｎｄ￣ｅｑｕｅｎｔ ｈｏｍｏｚｙｇｏｕｓ ｌｏｓｓｅｓ ｏｆ ｍｉＲ－３ １［Ｊ］．Ｉｎｔ Ｊ Ｃａｎｃｅｒ， ｎｏｍａｓ［Ｊ］．Ｃａｎｃｅｒ Ｌｅｔｔ，１９９６，１０３（２）：１６３—７０． ２００９，１２４（９）：２２３６—４２． ［１５］Ｋｉｎｇ—Ｙｉｎ Ｌａｍ Ａ，Ｏｎｇ Ｋ，Ｈｏ Ｙ Ｈ．Ｃｏｌｏｒｅｃｔｌａ ｍｕｃｉｎｏｕｓ ａｄｅｎｏｅａｒ－ ［４］ Ｗｅｉｓｓ Ｆ Ｕ，Ｍａｒｑｕｅｓ Ｉ Ｊ，Ｗｏｌｔｅｒｉｎｇ Ｊ Ｍ，ｅｔ ａ１．Ｒｅｔｉｎｏｉｃ ａｃｉｄ ｒｅ— ｃｉｎｏｍａ：ｔｈｅ ｃｌｉｎｉｃｏｐａｔｈｏｌｏｇｉｃ ｆｅａｔｕｒｅｓ ａｎｄ ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｃｅ ｏｆ ｐ１６ ａｎｄ ｃｅｐｔｏｒ ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｓ ｉｎｈｉｂｉｔ ｍｉＲ一１０ａ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ａｎｄ ｂｌｏｃｋ ｍｅｔａｓｔａｔｉｃ ｐ５３ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ［Ｊ］．Ｄｉｓ Ｃｏｌｏｎ Ｒｅｃｔｕｍ，２００６，４９（９）：１２７５—８３． ｂｅｈａｖｉｏｒ ｏｆ ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ ｃａｎｃｅｒ［Ｊ］．Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ，２００９，１３７（６）： ［１６］Ｃｈｉｅｎ Ｗ Ｗ，Ｄｏｍｅｎｅｃｈ Ｃ，Ｃａｔａｌｌｏ Ｒ，ｅｔ ａ１．Ｃｙｃｌｉｎ－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｋｉ－ ２１３６—４５． ｎａｓｅ １ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｉｓ ｉｎｈｉｂｉｔｅｄ ｂｙ ｐ１６（ＩＮＫ４ａ）ａｔ ｔｈｅ ｐｏｓｔ—ｔｒａｎ－ ［５］ Ｏｈｕｃｈｉｄａ Ｋ，Ｍｉｚｕｍｏｔｏ Ｋ，Ｌｉｎ Ｃ，ｅｔ ａ１．ＭｉｃｒｏＲＮＡ一１０ａ ｉｓ ｏｖｅｒｅｘ— ｓｃｒｉｐｔｉｏｎａｌ ｌｅｖｅｌ ｔｈｒｏｕｇｈ ｔｈｅ ｍｉｃｒｏＲＮＡ ｐａｔｈｗａｙ［Ｊ］．Ｏｎｃｏｇｅｎｅ， ｐｒｅｓｓｅｄ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｐａｎｃｒｅａｔｉｃｃａｎｃｅｒ ａｎｄ ｉｎｖｏｌｖｅｄ ｉｎ ｉｔｓ ｉｎｖａｓｉｖｅｎｅｓｓ ２０１１。３０（１６）：１８８０—９１． ｐａｒｔｉａｌｌｙ ｖｉａ ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ＨＯＸＡ１ ｇｅｎｅ［Ｊ］．Ａｎｎ Ｓｕｒｇ Ｏｎ— （上接第１１６７页） ｔｈｅｌｉａｌ ｔｏ ｍｅｓｅｎｃｂｙｍａｌ ｔｒａｎｓｉｔｉｏｎ（ＥＭＴ）ａｎｄ ｔｈｅｉｒ ｒｏｌｅ ｉｎ ｔｅｎａｌ ［２］Ｔａｎ Ｔ Ｋ，Ｚｈｅｎｇ Ｇ Ｐ，Ｈｓｕ Ｔ Ｔ，ｅｔ ａ１．Ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ ｍａｔｉｒｘ ｍｅｔａｌｌｏ— ｐａｔｈｏｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ［Ｊ］．Ｅｘｐｅｒｔ Ｒｅｖ Ｍｏｌ Ｍｅｄ，２０１０，１２：ｅｌ７． ｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ－９ ｍｅｄｉａｔｅｓ ｅｐｉｔｈｅｌｉｌａ－ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｔｒａｎｓｉｔｉｏｎ ｉｎ ｖｉｔｒｏ ｉｎ ［６］ 张勉之，张敏英，赵松，等．Ｊａｎｕｓ激酶抑制剂对高糖诱导的 ｍｕｒｉｎｅ ｒｅｎａｌ ｔｕｂｕｌａｒ ｃｅｌｌｓ［Ｊ］．Ａｍ Ｊ Ｐａｔｈｏｌ，２０１０，１７６（３）：１２５６ 肾小管上皮细胞转分化的作用［Ｊ］．中国医学科学院学报， ２００７，２９（３）：３６４—９． —７Ｏ． ［３］ Ｋｉｄａ Ｙ，Ａｓａｈｉｎａ Ｋ，Ｔｅｒａｏｋａ Ｈ，ｅｔ ａ１．Ｔｗｉｓｔ ｒｅｌａｔｅｓ ｔｏ ｔｕｂｕｌｒａ ［７］ Ｎｉｇｈｔｉｎｇａｌｅ Ｊ，Ｐａｔｅｌ Ｓ，Ｓｕｚｕｋｉ Ｎ，ｅｔ ａ１．Ｏｎｃｏｓｔａｔｉｎ Ｍ，ａ ｃｙｔｏｋｉｎｃ ｒｅｌｅａｓｅｄ ｂｙ ａｃｔｉｖａｔｅｄ ｍｏｎｏｎｕｃｌｅａｒ ｃｅｌｌｓ，ｉｎｄｕｃｅｓ ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ ｃｅｌｌ— ｒｐｉｔｈｅｌｉｌａ－ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｔｒａｎｓｉｔｉｏｎ ａｎｄ ｉｎｔｅｒｓｔｉｔｉａｌ ｆｉｂｒｏｇｅｎｅｓｉｓ ｉｎ ｔｈｅ ｍｙｏｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ ｔｒａｎｓｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｖｉａ Ｊａｋ／Ｓｔａｔ ｐａｔｈｗａｙ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ｏｂｓｔｒｕｃｔｅｄ ｋｉｄｎｅｙ［Ｊ］．Ｊ Ｈｉｓｔｏｃｈｅｍ Ｃｙｔｏｃｈｅｍ，２００７，５５（７）：６６１ ［Ｊ］．Ｊ Ａｍ Ｓｏｃ Ｎｅｐｈｒｏｌ，２００４，１５（１）：２１—３２． —７３． ［８］ 石永利，孟凡青．ＴＧＦ．Ｂ诱导的上皮一间叶转变与肺纤维化 ［４］ Ｂｅｄｉ Ｓ，Ｖｉｄｙａｓａｇａｒ Ａ，Ｄｊａｍａｌｉ Ａ．Ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ—ｔｏ—ｍｅｓｅｎｅｈｙｍａｌ ｔｒａｎ— ［Ｊ］．临床与实验病理学杂志，２０１１，２７（５）：５２７—３０． ｓｉｔｉｏｎ ａｎｄ ｃｈｒｏｎｉｃ ａｌｌｏｇｒａｆｔ ｔｕｂｕｌｏｉｎｔｅｒｓｔｉｔｉａｌ ｉｆｂｒｏｓｉｓ［Ｊ］．Ｔｒａｎｓｐｌｎａｔ ［９］ Ｔａｎｇ Ｓ Ｃ，Ｃｈａｎ Ｌ Ｙ，Ｌｅｕｎｇ Ｊ Ｃ，ｅｔ ａ１．Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉｌａ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ａｄ— Ｒｅｖ（Ｏｒｌａｎｄｏ），２００８，２２（１）：１—５． ｖａｎｃｅｄｇｌｙｃａｔｉｏｎ ｅｎｄ—ｐｒｏｄｕｃｔｓ ｏｎ ｒｅｎａｌ ｔｕｂｕｌａｒ ｃｅｌｌ ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ ［５］Ｂｕｍｓ Ｗ Ｃ，Ｔｈｏｍａｓ Ｍ Ｃ．Ｔｈｅ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｍｅｄｉａｔｏｒｓ ｏｆ ｔｙｐｅ ２ ｅｐｉ一 ［Ｊ］．Ｎｅｐｈｒｏｌｏｇｙ（Ｃａｒｌｔｏｎ），２０１１，１６（４）：４１７—２５．
