实验项目名称: 柱色谱和薄层色谱 一、实验目的:
1.了解色谱法分离提纯有机化合物的基本原理和应用. 2.掌握柱层析, 薄层层析的操作技术. 二、实验基本原理（或主、副反应式）
色谱法的基本原理是利用混合物各组分在某一物质中的吸附或溶解性能分配的不同,或其亲和性的差异,使混合物的溶液流经该种物质进行反复的吸附或分配作用,从而使各组分分离.色谱法在有机化学中的应用主要包括分离混合物，精致提纯化合物，鉴定化合物，观察一些反应是否完成等等；吸附色谱主要以氧化铝、硅胶等为吸附剂，将一些物质自溶液中吸附到它的表面，而后用溶剂洗脱或展开，利用不同化合物受到吸附剂的不同吸附作用，和它们在溶剂中不同的溶解度，也就是利用不同化合物在吸附剂和溶液之间的分布情况不同而得到分离。吸附色谱分离课可采用柱色谱和薄层色谱两种方式。
三、主要试剂及主、副产物的物理常数(列举实验所涉及的主要物质与试剂需要的物理常数就可以)
溶解度：克/100ml溶剂 水 醇 溶 溶 溶 醚 溶 溶 不溶 名称 分子量 性状 熔点（℃） （℃） 沸点 偶氮苯 苏丹Ⅲ 荧光黄 182.2 232 332.3 橙色片状晶体 棕色粉末 黄红色至红色粉末 68 320 293 不溶 不溶 不溶 四、主要试剂规格及用量
薄层色谱：样品1：1%偶氮苯的苯溶液，样品2: 1%苏丹Ⅲ的苯溶液，样品3：以上两者的混合物；展开剂；9:1的无水苯—乙酸乙酯，硅胶G薄层板。 柱色谱：荧光黄（1mg）和次甲基蓝（1mg）溶于1ml 95%乙醇溶液、中性氧化铝（100—200目）、石英砂；洗脱剂；95%的乙醇，冰醋酸。 五、实验装置图
见纸质预习报告上面的图示
六、实验简单操作步骤
A薄层色谱：1. 硅胶G薄层板的制备；
2.点样，先用铅笔在薄层板一端1cm处轻轻划一横线作为起始线，然后用毛细管吸取样品，在起始线上小心点样，斑点直径一般不超过2mm，点样要轻，不可刺破薄层；
3.显色，在层析缸中加入配好的展开剂，其高度不超过1cm。将点好的薄层板小心放入层析缸中，点样一端朝下，浸入展开剂中，盖好瓶盖，观察现象，然后晾干，观察斑点位置，计算Rf值；
4.显色，凡可用于纸色谱的显色剂都可用于薄层色谱。
B柱色谱：1.装柱，用镊子取少许脱脂棉放于干净的色谱柱底部，轻轻塞紧，关闭活塞，向柱中倒入溶剂至约为柱高的3/4处，通过一干燥的玻璃漏斗慢慢加入色谱柱用中性氧化铝，打开活塞，控制流出速度为1滴/秒；并用橡皮塞轻轻敲打色谱柱下部，使填装紧密，当装柱至3/4时，再在上面加一片小圆滤纸或3mm厚的石英砂。注意操作时一直保持上述流速不能使液面低于氧化铝的上层； 2.上样，当溶剂液面刚好流至滤纸面时，立即沿柱壁加入待分离样品溶液，当此溶液流至接近滤纸面时，立即用少量溶剂洗下管壁的有色物质，如此2—3次，直至洗净为止；
3.洗脱，用95%的乙醇洗脱，控制流出速度。整个过程都应有洗脱剂覆盖吸附剂，观察蓝色带先出现，用锥形瓶收集洗脱液。待蓝色分离后，用冰醋酸洗脱，分离出黄色的色带。 备注（注意事项）：
1、点样时，各样点间距1—1.5cm，样点直径应不超过2mm 2.柱层析时，柱子要致密紧实，无气泡。 姓名： 班级： 时间：
