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Rh（D）血型鉴定
一．原理：Rh抗原主要有5种：C、c、D、E、e。抗D抗体是Rh血型系统中最常见的抗体。Rh抗体主要是不完全抗体，如用5种不完全抗体的血清作鉴定，可将Rh血型系统分为18个型别。在临床上，因D抗原的抗原性最强，出项频率高，故一般只做D抗原的血型鉴定。凡带有D抗原者，称为Rh（D）阳性，不带有D抗原者，称为Rh（D）阴性。 二．试剂及标本
1．单克隆Rh（D）诊断试剂（IgM），由上海生物技术有限公司提供。 2．被检者5％红细胞，洗涤1次 3．5％Rh D阳性红细胞悬液 三．操作步骤：
1．将1滴盐水抗D试剂加入试管，再加5％受检红细胞悬液1滴，1000rpm，1分钟，观察凝集结果，根据凝集与否来确定相应的抗原。
2.对照试验：取试管2支，标明阳、阴标记，分别加入5％RhD阳性，阴性红细胞各1滴，各管再加抗D血清1滴，1000rpm，观察结果，如阳性对照凝集，阴性对照不凝集，表明本试验成立。
3. 如发现抗D检测管不凝集，被检者可能为Rh阴性，需用不同批次的抗D血清再进一步试验，并且用间接抗人球蛋白试验来鉴定是否有D抗原，还是弱D型抗原。受检红细胞与各批抗D 血清不凝集或只与其中一批或数批抗D血清凝集，但在间接抗球蛋白试验中都凝集者，都属弱D型细胞。 四. 结果判别：
1.常规情况下，红细胞只作Rho（D）定型，根据反应格局报告为：Rho（D）阴性，Rho（D）阳性，Rho(D)弱阳性。
2.当有特殊情况时，如抗体筛选时有不规则抗体存在等情况下，才需做Rh血型抗原全部表现型定型。
五．Rh血型鉴定试验中应注意的问题：
1．Rh定型主要鉴定D抗原，定型时应按抗-D血清试剂的使用说明进行，并注意必须要有严格的对照试验，包括抗原的阴、阳性对照以及试剂对照试验。 2．根据美国AABB技术手册第12版（1996）规定：Du这个术语不再使用，携带弱的D抗原的红细胞仍被归类为D阳性，称为弱D（weak D）。与正常D阳性红
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细胞相比，弱D红细胞或者是D抗原数量减少，或者缺少正常D抗原中一个或多个抗原表位。
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3．弱D型人经输注D阳性红细胞后可产生抗D抗体。所以病人为弱D型应作Rh阴性论，应输注Rh阴性血液；供血者为弱D型者应作Rh阳性论，不应输血给Rh阴性的病人。
4．导致Rh血型鉴定可能出现假阳性的原因：
4.1受检细胞已被免疫球蛋白致敏，或标本血清中含有引起红细胞凝集的因子。 4.2受检细胞与抗血清孵育的时间过长，含高蛋白的定型试剂会引起钱串状形成。 4.3标本抗凝不当，受检过程中出现凝血或出现小的纤维蛋白凝块，误判为阳性。 4.4多凝集细胞，或抗血清被污染,均可能造成假阳性。 5．可能出现假阴性的原因：
5.1受检细胞悬液浓度太高，与抗血清比例失调。 5.1漏加或错加定型血清。
5.3定型血清的使用方法错误，没有按说明书进行。 5.4离心后重悬细胞扣时，摇动用力过度，摇散微弱的凝集。 5.5抗血清保存不当，导致失效。
六. 规范性引用文件：《全国临床检验操作规程》、《临床检验学》、《项目说明书》、
《中华医学检验全书》。
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