・２２８・ ２０１０年１月第４卷第２期Ｃｈｉｎ Ｊ Ｍｏｄ Ｄｍｇ Ａｐｐｌ，Ｊａｎ ２０１０．Ｖｏ１．４。Ｎｏ．２ 强：活疫苗接种形成的免疫力能维持一个较长的时间。一般 来说，基础免疫引发的初次免疫应答形成的免疫力，至少可 ①运输与保存条件严格：由于活疫苗是减毒或无毒的活 病原体，因而活疫苗储存时，要求病原体存活的适宜条件，特 维持３～５年，甚至７～８年或更长；④形成局部与全身免疫： 按同种病原体感染的途径接种活疫苗，不仅可产生全身免 别是温度条件；②稳定性差，有效期短：活疫苗稳定性差，随 保存时间延长，效价降低较快。疫苗中活原体存活有一定 疫，而且还能形成局部免疫。 时限。 ６活疫苗的缺点 针灸治疗脑出血术后吞咽困难２５例临床体会 鹏 笔者近年采用针灸治疗脑出血术后吞咽困难６０例，疗 餐缓慢，时有发呛）５例，全部有效。 效满意。现报告如下。 ３典型病例 １资料与方法 谢某，男性，６５岁。２００９年３月５日人院。高血压史３０ １．１一般资料本组２５例，男性１８例，女性７例；年龄最大 年，血压波动于２４～１９／１５—１２ ｋＰａ，间断服用复方降压胶 ６３岁，最小４１岁；由高血压病引起２４例，脑外伤引起ｌ例为 囊。１个月前因工作劳累下午２时突感头晕头痛，随即晕倒 颅内血肿清除术后２０ ｄ来住院治疗。 在地，经市级某医院头颅ＣＴ诊断为脑出血，出血量７Ｏ ｍｌ，患 １．２治疗方法①皮肤针治疗：先用酒清棉球消毒局部，然 者处于昏迷状态，急给手术清除颅内血肿。术后遗留右侧肢 后用消毒干净的梅花针叩刺甲状软骨两侧，条刺，使之微见 体瘫痪，失语，吞咽困难，因不能进食而保留胃管出院。患者 出血，然后用干棉擦净血迹，隔日１次，１０次１疗程；②体针 为进一步治疗而人本院。经用上述治疗方法治疗１周．能进 治疗：用２８号３．５寸毫针，取天突穴进针２寸深，１次／ｄ；③ 少量流食，继治疗１疗程去掉胃管可自己进食，巩固治疗２ 舌针治疗：在舌面进针，取舌的后１／３和舌体两侧，分别用２８ 个疗程吞咽正常。 号２寸毫针，针尖向舌根部方向进针１．５寸深。同时取金 ４讨论 津、玉液，均不留针，针后出血２—３滴为宜，１次／ｄ，７次为１ 脑出血术后吞咽困难，为临床多见而又棘手的病症。西 疗程，５个疗程结束后评定效果。 医多用改善脑细胞代谢药静脉滴注及口服药，效果并不理 ２结果 想。笔者采用传统针灸综合法治疗，多在一疗程时症状改 痊愈（症状消失，饮食自如）２０例，显效（去掉胃管，但进 善。笔者认为，针刺舌体能增强舌的活动功能，而局部叩刺， 既刺激了周围神经，又改善了局部循环，而起到活 化瘀之 作者单位：４０２２６０重庆市江津区中医院 功，促使气血运行畅达，吞咽功能恢复。 ・综述・ 中药治疗类风湿性关节炎的实验研究进展 冯春荣李兆翌黄真 【摘要】 目的 探讨中药治疗类风湿性关节炎的实验研究进展。方法 对近年来中药治疗类风 湿性关节炎实验研究的相关文献进行综述。结果 类风湿性关节炎动物模型主要可分为佐剂诱发和Ⅱ 型胶原诱发，中医病症结合模型也取得了初步成功。中药在干预类风湿性关节炎的研究中也取得了较 大成绩。结论类风湿性关节炎动物模型的推广存在一定的局限性。中药的研究证实了中药治疗类风 湿性关节炎的作用靶点，但仍存在一些不足。 【关键词】类风湿性关节炎；动物模型；中药 类风湿性关节炎（ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ ａｒｔｈｒｉｔｉｓ，ＲＡ）是一种自身免 毒副作用以及逐渐失去临床疗效，结果多数患者的病情不能 疫功能障碍性疾病，是以关节病变为主并伴有多系统受累的 得到长期有效的控制 。利用类风湿性关节炎动物模型评 慢性炎性反应性疾病；主要表现为滑膜增生，关节破坏，功能 价中药药效并探讨其作用机制是寻找新型药物的主要途径。 丧失等。ＲＡ在世界范围内的平均患病率约１％，我国的发 近年来，国内外针对中药复方和单味药的抗ＲＡ作用已开展 病率为０．３２％～０．３６％…，是一种致残率较高的疾病，严重 了大量的实验研究工作，很多中药的有效组分和作用机制得 影响患者的生活质量。由于ＲＡ病因尚未清楚，很难治愈， 到初步阐明，新的治疗药物不断涌现。 应用改善疾病的抗风湿药物，患者几年后常常会出现明显的 １类风湿关节炎的动物模型 １．１ １／型胶原诱发关节炎模型胶原诱导性关节炎是具有 作者单位：３１００５３浙江中医药大学药学院 种属特异性胶原Ⅱ型免疫后所诱发的实验动物模型。Ⅱ型 应用２０１０年１月第４卷第２期Ｃｈｉｎ Ｊ Ｍｏｄ Ｄｒｕｇ ＡＰＰ 塑 ： ： ： ・２２９－ 胶原诱发的关节炎动物模型，选择的动物主要有Ｗｉｓｔａｒ大 雌激素应用法、低钙饲养法等）所致肾虚对ＲＡ发病的影响， 成功的研制出肾虚ＣＩＡ模型。 ２中药研究 鼠、ＬＥＷ大鼠、ＤＢＡ／１Ｊ小鼠、Ｃ５７ＢＬ小鼠等，雌雄均可，其中 以ＬＥＷ大鼠及ＤＢＡ／１Ｊ小鼠应用较多。造模方法一般以动 物足底、尾根部１～２ ｃｍ处或背部取点皮内注射一定浓度的 弗氏佐剂或完全弗氏佐剂与Ⅱ型胶原的混合液 。林红 等ｌ３ 曾建立Ⅱ型胶原蛋白（２．５ ｍｇ／ｍ１）大鼠关节炎模型（Ｃ Ⅱ．Ａ）与完全佐剂（１０ ｍｇ／ｍ１）大鼠关节炎（Ａ—Ａ）模型并进行 比较，结果ＣⅡ和完全弗氏佐剂注射诱导后第２天，大鼠注 射足有明显肿胀，出现急性免疫反应。第１４～２ｌ天ＣⅡ大鼠 ２．１单味药研究中医常采用祛风、通络、散寒、除湿、清热 等法祛邪，兼以扶正治疗。常用雷公藤、青风藤、威灵仙、白 芍等，多按中医辨证论治制成复方应用。雷公藤具有除风湿 止痹痛的功效，是免疫抑制剂增效剂、ＩＬ一２拮抗剂。Ｚｈｏｕ Ｊ 以不同剂量雷公藤甲素分别对小鼠和大鼠灌服给药，结 果发现，本品可剂量依赖性抑制外周血和淋巴结中ＣＤ；细 胞水平，增加ｃＤ 细胞数量。ｃＤ 细胞可与ＨＬＡ２Ⅱ抗原结 对侧足出现红肿，第３５—４５天大鼠前足出现红肿，并有关节 变形。Ａ＿Ａ大鼠注射后１８～２５ ｄ左右出现对侧足肿胀。Ｃ Ⅱ一Ａ大鼠关节炎持续时间较长，４个月后肿胀仍明显，Ａ—Ａ 大鼠４个月后足部肿胀逐渐消退。 ＣⅡ一Ａ模型因其遗传背景和免疫病理学改变与临床类风 湿性关节炎极为相似而成为目前研究类风湿性关节炎较为理 想的动物模型。但其造模成功率较佐剂关节炎模型低，造模 条件要求较高，成本也相对较高，可做为后期深入研究选择。 １．２佐剂诱发关节炎模型佐剂性关节炎是一种典型的免 疫性炎症模型。佐剂诱发的关节炎动物模型，动物选择一般 主要为Ｗｉｓｔａｒ大鼠、ＳＤ大鼠、兔等，雌雄均可。造模方法为 大鼠足趾不皮内注射一定剂量的完全弗氏佐剂，原发性病变 表现为足趾及关节部肿胀的急性炎症反应，继发病变一般于 至炎后１４～２０ ｄ左右出现，２０ ｄ达到高峰 。梅焕平等 以４～６月龄青紫蓝兔趾部和背部多点皮下注射完全弗氏佐 剂诱发兔佐剂关节炎模型，结果致炎第１周起注射肢腕部周 径明显增加，第３周后动物体重显著下降，侧肢周径开始增 加，但左右肢周径差异无统计学意义。经病理学诊断模型成 功率为６４％。有研究选用昆明小鼠佐剂性关节炎模型进行 相关研究…。 ，同样取得了成功。 １．３蛋白性关节炎模型蛋白性关节炎动物模型，选择的 动物一般为新西兰白兔，雌性均可。造模方法是对兔背部肩 胛骨间多点皮下注射和膝关节内注射含有卵蛋白的完全弗 氏佐剂，即３％卵蛋白溶液与等体积不完全弗氏佐剂混合，诱 发兔蛋白性关节炎模型 １３，１４］。李亚非等 以成年新西兰兔 背部肩胛骨５点皮下注射和有膝关节内注射含有卵蛋白的 完全弗氏佐剂，结果关节内注射佐剂后３～７ ｄ，兔膝关节明 显肿胀，宽度平均２．５ ｃｍ，行走时右后肢提起，不敢负重，皮 温高，颜色发红。第１４天时，关节宽度２．４ ｅｍ。第８Ｏ天处 死时，关节宽度２．２ ｃｍ。取材时发现，软组织水肿，滑膜增 厚，关节腔内有积液。滑膜组织病理学检查可见滑膜充血、 水肿、增厚变疏松，坏死灶有纤维素被覆，模型成功。 １．４中医病症结合关节炎模型 ＲＡ动物模型并不完全代 表中医痹证，故在ＲＡ动物模型的基础上，进行中医痹证的 研究。肖长虹等 在大鼠胶原诱导性关节炎（ＣＩＡ）的诱导 阶段，给予风寒湿、风湿热刺激或同时给予葡萄球菌肠毒素 Ｂ（ＳＥＢ），第３１天取踝关节标本作组织切片观察，结果显示， 滑膜细胞增生与关节炎症积分呈显著正相关；单纯风湿热显 著加重雌性鼠关节软骨侵袭程度，且有加重滑膜内炎症细胞 浸润及血管增生的趋势；风寒湿与ＳＥＢ外涂协同作用有加重 雄性鼠的炎症细胞侵润及血管增生趋势。上述结果支持雌 性鼠风湿热ＣＩＡ及雄性鼠风寒湿ＣＩＡ加ＳＥＢ分别作为类风 湿性关节炎中医风湿热痹及风寒湿痹模型。吕爱平等 采用复合因子方法制作ＲＡ病证结合模型（肾虚ＣＩＡ模型）， 研究了不同方法（安基导眠能应用法、雌鼠卵巢切除法、雄鼠 合，并介导粘附和相应信号转导，与ＲＡ患者的过强免疫相 关。因而，雷公藤甲素可通过调节机体ＣＤ；／ｃＤ 的平衡， 纠正ＲＡ异常的免疫功能，从而达到治疗ＲＡ的目的。青风 藤对机体免疫功能有明显的抑制作用，可明显降低小鼠炭廓 清率和脾脏、胸腺的重量，抑制小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功 能。刘继红等 利用体外试验证实，青风藤碱可抑制佛波 醇酯（ＰＭＡ）、刀豆蛋白Ａ（Ｃｏｎ Ａ）、ＬＰＳ和ａｎｔｉ－ＣＤ３ ｍＡｂ诱导 的小鼠脾淋巴细胞的增殖，降低升高的ＣＤ；／ｃＤ 比值，提 高早期凋亡百分率。夏伦祝等 利用弗氏完全佐剂足趾皮 内注射致大鼠关节炎，观察威灵仙总皂苷２５、５０、１００ ｍｇ／ｋｇ 三种剂量对佐剂性关节炎大鼠原发性病变和继发性足跖肿 胀的影响，以及对细胞因子ＩＬ一１、ＩＬ－６、ＩＬ．８、ＴＮＦ一０【和炎症介 质ＰＧＥ２含量的影响。结果威灵仙总皂苷２５、５０、１００ ｍｇ／ｋｇ 对佐剂性关节炎大鼠的原发性和继发性足跖肿胀都有显著 性作用，同时对ＩＬ－１、ＩＬ一６、ＩＬ一８、ＴＮＦ．ｏ【和ＰＧＥ２有抑制作用 或趋势。白芍具有镇静、止痛、抗炎和免疫调节等作用，王斌 等 对白芍提取物白芍总苷进行研究，认为白芍总苷可以 降低佐剂性关节炎（ＡＡ）大鼠滑膜细胞培养上清液白细胞介 素１（ＩＬ一１）的生物活性。 ２．２复方药研究李宝丽等 观察甘草附子汤（甘草、附 子、桂枝、白术）和痛痹方（附子、桂枝、白术、甘草、羌活、当 归、牛膝、海风藤）对ＩＩ型胶原诱导的关节炎（ＣＩＡ）大鼠滑膜 组织病理学及相关细胞因子表达水平的动态变化，从多靶点 探讨中药复方治疗类风湿关节炎（ＲＡ）的可能机制。结果表 明：甘草附子汤和痛痹方可明显抑制ＣＩＡ大鼠关节肿胀率， 光镜观察滑膜组织病理学形态有显著改善，治疗３周时，血 清ＳＡ、ＩＬ－２和ＴＮＦ—ｄ的水平较模型组显著降低（Ｐ＜０．Ｏ１）， 用药６周后，各组均接近正常水平。周军等 观察葛根汤 （葛根、麻黄、桂枝、白芍、甘草、生姜等）对佐剂性关节炎大鼠 关节液炎症介质的影响，结果表明，葛根汤可明显抑制致炎 １９ ｄ的佐剂性关节炎大鼠关节液中ＩＬ．１Ｂ、ＴＮＦ一 的活性及 ＰＧＥ２的含量。 ３结语 现阶段对ＲＡ的研究已经深入到细胞水平、分子水平， 乃至基因水平，但由于ＲＡ病因极其复杂，到目前为止医学 界仍没有攻克ＲＡ这一世界性难题。随着临床应用研究的 深入，有越来越多的文献报告生物制剂的长期使用有可能导 致严重的感染或活化隐性结核 。且其治疗代价昂贵， 每年约需１万美元，即便是美国也只有１０％的ＲＡ患者接受 生物制剂治疗 。中医药治疗本病具有独特优势，近几年 随着ＲＡ发病机制的研究进展，中医药研究从单纯的疗效及 抗炎、镇痛研究方面取得了很大进展。但到底中医药治疗 ＲＡ是偏于抗炎作用还是免疫作用，缺乏明确阐述，抗炎是针 对何种炎性反应，免疫抑制又是针对免疫的哪些病理环节， ・２３０・ ２０１０年１月第４卷第２期Ｃｈｉｎ Ｊ Ｍｏｄ Ｄｒｕｇ Ａｐｐｌ，Ｊａｎ ２０１０，Ｖｏｌ＿４。Ｎｏ．２ 对其作用机理缺乏进一步研究。虽然实验研究较深人，但造 模方法和其判断标准各家不一，影响了可比性。相信经过一 定时间的探索和研究传统中医药在ＲＡ领域里仍发挥其独 特的优势。 参考文献 ［１］叶任高，陆再英．内科学．人民卫生出版社，２００４：８８６． ［２］ Ｓｃｈｉｆ ＭＨ，Ｗｈｅｌｔｏｎ Ａ．Ｒｅｎａｌ ｔｏｘｉｃｉｔｙ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｄｉｓｅａｓｅ ｍｏｄｉ－ ｌｙｉｎｇ ａｎｔｉｒｈｅｕｍａｔｉｃ ｄｒｕｇｓ ｕｓｅｄ ｆｏｒ ｔｈｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ ａｒｔｈｉｒｉｔｉｓ．Ｓｅｍｉｎ Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ Ｒｈｅｕｍ，２０００，３０：１９６． 基础研究．北京：中医古籍出版社，１９９９：９２． ［１７］ 吕爱平，王安民，爱景录，等．肾虚骨痹［类风湿性关节炎］发 病机理研究．中医杂志，１９９５，３６（８）：４９２． ［１８］ 徐世杰，吕爱平，王安民，等．卵巢切除所致肾虚对免疫性关 节炎小鼠血清钙素和肿瘤坏死因子的影响．中国中西医结合 杂志，１９９９，１９（１）：３４－３６． ［１９］ Ｚｈｏｕ Ｊ，Ｘｉａｏ Ｃ，Ｚｈａｏ Ｌ，ｅｔ １ａ．Ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆｔｉｒｐ ｔｏｌｉｄｅ ｏｎ ｃｏ； ａｎｄ ＣＤ；ｃｅｌｌｓ ｉｎ Ｐｅｙｅｒ’Ｓ ｐａｔｃｈ ｏｆ ＳＤ ｒａｔｓｗｉｔｈ ｃｏｌｌａｇｅｎ ｉｎｄｕｃｅｄ ａｒｔｈｒｉｔｉｓ．Ｉｎｔ Ｉｍｍｕｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌ，２００６，６（２）：１９８． ［２Ｏ］ 刘继红，李卫东，滕慧玲，等．青藤碱治疗类风湿性关节炎免 疫作用和机制．药学学报，２００５，４０：１２７． ［２１］ 夏伦祝，徐先祥，张睿．威灵仙总皂苷对大鼠佐剂性关节炎抗 ［３］林红，贺永怀，黎燕，等，Ⅱ型胶原蛋白与完全弗氏佐剂大鼠关 节炎模型的建立和比较．中国实验动物学报，１９９９，７（１）：１， ［４］ 韩晓枫，马宝骊，张继荚，等．鸡胶原Ⅱ诱导大鼠类风湿关节炎 模型的建立．上海免疫学杂志，２００１，２１（６）：３３０． ［５］ 鲁静，赵丽娟，笠间毅，等．血管内皮生长因子在Ⅱ型胶原诱导 的关节炎小鼠关节组织中的表达．中华风湿病学杂志，２００１，５ （５）：３０５． 炎作用的研究．安徽医药．２００９，１３（４）：３６３． ［２２］ 王斌，陈敏珠，徐叔云．白芍总苷对佐剂性关节炎大鼠滑膜细 胞功能和脾细胞增殖反应的影响．中国药理学与毒理学杂 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其中急诊室最高占６２．８６％。在临床护理中护士的防护意识存在差异，每次都戴手套为７Ｏ人次，占 ３５％，经常戴４５人次（２２．５％），偶尔戴７１人次（３５．５％），觉得影响操作而不戴的１４人次（７％）；每次都 戴的比例３５％，与非每次都戴的比例６５％相比有统计学差异。结论护士的血源性职业暴露途径以针 刺最多见，不同科室暴露的构成比以急诊科最高，护士自我防护意识较为淡薄，在获得医院重视的前提 下通过行政干预加强职业防护教育，争取有效预防措施，将职业暴露风险降到最低水平。 【关键词】血源性；职业暴露；防护措施 作者单位：６３５０００四川省达县人民医院
